工蜂是生殖器官發育不全的雌性蜂，負責產卵以外一切巢內及巢外的工作。
幼蜂孵化後的3天內負責清理蜂巢為清潔蜂；3~13天內，開始餵飼蜂王、工蜂及雄蜂幼蟲為管家蜂；羽化l2~18天後，蜜蜂開始泌蠟建築蜂巢為建築蜂；羽化15天後負責守衛蜂巢的工作為守衛蜂；工蜂羽化21天前在巢內工作為內勤蜂；21天後失去泌蠟功能為外勤蜂，平均每隻蜜蜂可出勤一百餘次，必要時6~7日齡的工蜂亦可出巢採集，老齡蜂重新泌蠟築巢及泌漿育幼。 在長期無蜂王情形下，工蜂由其他工蜂餵飼王漿後，其生殖器官會發育而產下未受精卵，孵化後發育成雄蜂。工蜂的壽命在採集期為1~2個月，冬季為3~5個月。
A. 觸角：長在頭的前上方，主要是用來聞味道的。 B. 複眼：長在頭的兩側，由很多小眼睛所集合而成的。 C. 單眼：共有三個，成三角形排列在兩複眼之間，是用來幫助 複眼辨別物體明暗。 D. 口器：是蜜蜂的嘴巴，用來咀嚼食物、咬開巢房蓋、吸取花 蜜用。
腹部由數節構成，有蠟腺開口及螫針。螫針為產卵管，後方連有毒囊，也是自衛武器。當螫針刺入體內後，兩根針的收縮導致螫針滑入皮膚內，繼續抽動30-60分鐘，並放出毒液，蜜蜂在失去蜂針後一兩日便死亡。
巢房分為大小兩種，大多數較小的房室，是養育工蜂幼蟲的地方。較大的房室多建在巢脾的側緣或底緣，是飼育雄蜂的房室。兩種房室都可作為貯存花蜜、花粉以及短期儲存水份之用。第三種形式的房室則長度較長，成圓錐形，多懸垂於底部邊緣，是用來撫育蜂王，稱為王台。
一個蜂巢內會同時有數個王台存在，當第一隻蜂王羽化後，會將其他尚未羽化的處女蜂王殺死，並毀壞王台；若有兩隻同時羽化，則會互相攻擊直到一方死亡為止。
當工蜂太多時，蜂王所分泌的蜂王質無法傳遍整個蜂群時，便會引起分封。
若蜂王被捉走，又不讓蜂群產生新蜂王，由於缺少了蜂王質抑制工蜂卵巢發育，工蜂便能產卵。但由於所產為未受精卵，故發育出來皆為雄蜂。
天氣炎熱時，工蜂會外出採水灑在巢框上，這時其他的工蜂會一起拍動翅膀，就如同電風扇一般，以使蜂巢中的空氣流通，這樣便能降低蜂巢中的溫度了。
天氣太冷時，工蜂會聚集擁抱在一起，形成一個能保溫的絕緣體，同時也會振動翅膀來發散熱量，就如同人類會在天冷時藉由活動來提高體溫一樣。
相同的授精卵，產在不同的房室中，蜜蜂餵的食物也不同。
蜂王幼蟲天天可食用蜂王乳，蜂王自幼到成蟲一生都在享用蜂王漿。工蜂及雄蜂的幼蟲只能食用三天蜂王乳，第四天改食蜂蜜與花粉混合食物"蜂糧"。
由於後天食物的營養不同，而使工蜂的生殖腺因此缺乏促進卵巢發育的激素，失去正常的生殖機能，最後發育成不同個體，並造成不同階級。
新的雄蜂與未來的蜂后都會紛紛誕生。接著，一年一度的蜂后交配典禮就要開始了。首先老蜂后會離開蜂窩，帶著一群工蜂，在樹枝上停著。此時，工蜂就會在牠的身邊圍成一大圈。
老蜂王離開不久，第一隻小蜂后會誕生，並四處尋找牠的競爭對手而相互攻擊，直到有一方被鬥死為止。最後勝利的蜂后就會開始婚禮飛行，牠飛的很高，雄蜂會被小蜂后的氣味所吸引而跟隨著，試在空中和牠交配，交配完成後，雄蜂的腹部會破裂而死去，蜂后則飛回蜂窩。
